国家公務員総合職（化学・生物・薬学）H28年 問81解説

　問 題　　　　　

遺伝子工学実験で用いられる酵素に関する次の記述の ㋐、㋑、㋒ に当てはまるものの組合せとして最も妥当なのはどれか。

・ベクター自身のセルフライゲーションを防ぐため、制限酵素で切断した二本鎖 DNA の㋐末端のリン酸基をアルカリ性ホスファターゼにより除去する。

・制限酵素を用いて 10 kbp DNA の切断を行う際、AluⅠ（認識配列が4 塩基）を使用したときの平均的 DNA 断片数は、HindⅢ（認識配列が 6 塩基）を使用したときの約 ㋑ 倍となる。

・長さの異なる DNA と RNA を混ぜて DNAーRNA ヘテロ二本鎖を形成させた後、相補的なDNAーRNA 二重鎖形成部分の RNA だけを特異的に分解するには ㋒ を用いる。

㋐　㋑　㋒
1． 3’　8　  リボヌクレアーゼ A
2． 3’　16　リボヌクレアーゼ H
3． 5’　8　  リボヌクレアーゼ A
4． 5’　16　リボヌクレアーゼ H
5． 5’　16　リボヌクレアーゼ A

 

 

 

 

 

　解 説　　　　　

㋐ ですが
制限酵素で切断した DNA の「5’」末端にあるリン酸基を除去します。正解は 3 ~ 5 です。

㋑ ですが
10k つまり 10000 文字並んでいて、１つの文字として 4 種類（A,T,G,C) が用いられる文字列を考えます。適当な連続する 4 文字を見て、それが AluⅠの認識配列と一致する確率は 1/4⁴ です。一方、認識配列が 6 文字になると、一致確率は 1/4⁶ となります。従って、AluⅠの方が 16 倍切断されやすく、平均的断片数も 16 倍になると考えられます。

㋒ ですが
リボヌクレアーゼ（RNase）「A」 は、一本鎖 RNA 配列特異的です。ハイブリッド二重鎖の RNA 特異的分解酵素は RNase「H」です。

以上より、正解は 4 です。