国家公務員総合職（化学・生物・薬学）R5年問80解説

　問題　　　　　

核酸の定量法に関する記述㋐～㋓のうち、妥当なもののみを挙げているのはどれか。

㋐　核酸の電気泳動に使用するポリアクリルアミドゲルは、数百 bp 以上の比較的大きな核酸の分離に用いられる。

㋑　リアルタイム PCR における相対定量法の一つである DDCt 法 (比較 Ct 法) は、目的遺伝子と内在性コントロール遺伝子の増幅効率が異なる場合も正確に定量できる。

㋒　分光光度計を用いた核酸の定量では一般的に 260 nm の波長を用いる。このときの吸光度が 1 の場合、RNA の濃度は 40 ng/mL となる。

㋓　放射性核種を用いた in situ ハイブリダイゼーション法は、組織中の mRNA の発現分布を調べるのに用いられる。

1．㋐、㋑
2．㋐、㋒
3．㋑、㋒
4．㋑、㋓
5．㋒、㋓

正解．5

　解説　　　　　

㋐ですが
核酸の電気泳動には、アガロースゲルやポリアクリルアミドゲルが用いられます。これらはターゲットの塩基数で使い分けます。ポリアクリルアミドは、1000 bp 未満の核酸の分離に適しています。「比較的大きな核酸の分離に用いられる」のはアガロースゲルが妥当です。㋐は誤りです。

㋑ですが
リアルタイム PCR とは、PCR によって DNA サンプルの特定領域を 2 倍、4 倍… と増幅させつつ、増幅過程をリアルタイムで検出する手法です。モニターで見ていると DNA 量を表す線が少しずつ上昇していく　という形で、リアルタイムで見れます。

比較 Ct 法は、DNA サンプル量を知りたいと思った時に、増え方が同じような比較対照となる DNA と一緒に PCR にかける方法です。そのため、PCR による DNA の増幅効率が異なると、正確な定量はできません。㋑は誤りです。

㋒は妥当です。
一般的に波長 260 nm にて吸光度 1 を示す場合、二本鎖 DNA (dsDNA) は 50 μg、一本鎖 DNA (ssDNA) は 33 μg、RNA は 40 μg に相当します。

㋓は妥当です。
in situ は「その場で」といった意味です。ハイブリダイゼーションは、遺伝子工学の分野では「核酸の分子が相補的に複合体を形成すること」を意味します。

以上より、正解は 5 です。

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